标签：DNA 复习 质粒 细胞工程 双元 整合 Ti 杆菌 介导

简述农杆菌介导的双元载体T-DNA转基因的技术原理？

双元载体系统由农杆菌中两个自我复制的质粒构成。一种是微型质粒(mini-Ti plasmid),这是一种穿梭载体,可以在大肠杆菌和农杆菌中进行复制,含有左右T-DNA边界,在两个T-DNA边界之间插入目的基因。
另一种是辅助Ti质粒,为T-DNA向植物细胞的转移提供vir基因功能。
共整合策略(cointegration strategy),改造pBR322或是其他类似的大肠杆菌质粒,让它们携带T-DNA的一小部分。
这个新构建的质粒和Ti质粒的同源序列意味着,当它们共存于同一个农杆菌内时,两者之间会发生重组,使得pBR质粒整合进T-DNA区域。
这样,我们就可以把要克隆的DNA插入到pBR质粒的单酶切位点上,转化进含有Ti质粒的农杆菌,经重组新基因被整合进T-DNA。
感染植物后,新基因就和T-DNA一起被整合到植物染色体上。

标签：DNA,复习,质粒,细胞工程,双元,整合,Ti,杆菌,介导
来源： https://blog.csdn.net/whovian_L/article/details/111748304

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